细胞代谢活性检测MTT、XTT、MTS和CCK8是衡量细胞活力的常用工具，尤其是CCK8，因其低毒性而备受青睐。SRB比色法则以其无孵育时间限制，适用于大规模实验，然而，对于悬浮细胞，操作上稍显繁琐。
首先于塑料烧杯中装好 700ml 离子交换蒸馏水、一个适当大小磁子，杯口密封以蒸发皿或塑料薄膜。搅拌并调节水温至 35±5C。
1、实验结果的统计处理需根据具体实验要求来确定。你可以选择使用吸光度（OD）值、细胞存活率或细胞抑制率等作为统计指标。 在查阅相关文献时，你会注意到这些指标在文献中均有应用。你可以参考这些文献来选择最适合你实验的数据表达方式。 绘制实验曲线并不复杂，可以使用EXCEL或SPSS等软件工具来完成。
2、⒍理论未必都是对的。要根据自己的实际情况调整。⒎实验时应设置调零孔，对照孔，加药孔。调零孔加培养基、MTT、二甲基亚砜。对照孔和加药孔都要加细胞、培养液、MTT、二甲基亚砜，不同的是对照孔加溶解药物的介质，而加药组加入不同浓度的药物。⒏避免血清干扰。
3、要计算细胞抑制率，用1减去所得到的增殖率即可。
4、细胞培养与处理：将细胞培养在适当的条件下，根据实验需求进行药物处理或其他实验操作。 添加MTT溶液：在细胞处理完毕后，加入一定量的MTT溶液。让细胞在含有MTT的培养环境中继续培养一段时间。这段时间内，活细胞会将MTT还原成甲瓒。
实验步骤DAY 1： 离心并计数处于对数期生长的细胞。 在96孔板中均匀接种细胞，培养24小时。 DAY 2： 选择生长良好的细胞，配置不同浓度的样本溶液，培养后观察。 DAY 3/4： 解冻并离心MTT试剂，配置0.5mg/mL溶液。 加入MTT溶液，4小时后去除上清，溶解甲臜，测量570nm的吸光度。
操作指南与样本处理无论是组织、细菌细胞还是液体样本，处理步骤都需要根据预实验调整。以下是关键步骤的示例：组织样本：取0.1g组织，用提取液A处理，离心并提取上清液，加入提取液B后再次离心，取上清待测。细菌或细胞：收集一定数量的细胞，使用超声破碎处理，离心后提取上清液，同样与提取液B混合，待测。
在选定添加线的时候，注意要先右键 设为活动。然后在不处理，不然就是默认值，我当时摸索了半天。大家自己试试就会明白了。
如果药物有抑制细胞活性的作用，习惯上称之为IC50（称呼而已）。【实例操作1】细胞毒实验计算IC50 · 细胞毒实验：SRB法，MTT法 · 阴性对照组Concrol：给药浓度为0的含细胞的孔，实验中以该组细胞活力当成100%。· 空白组Blank：无细胞的孔，用于吸光度的调零（扣掉96孔板自身的一点儿吸光度）。
药物组织分布用Drug And Statistics软件算。药物组织分布是指药物吸收后随血液循环到各组织间液和细胞内液的过程。
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MTT的意思是多层厚度测试。接下来为您详细解释： 基础定义：MTT是英文“Multi-Layer Thickness Testing”的缩写，直译为多层厚度测试。这是一种测试方法，主要用于测量材料或产品的多层结构中的总厚度。在不同的工业领域，如电子、塑料、包装等，这种测试方法都有广泛的应用。
MTT法，即甲基四唑溴化物法，常用于细胞毒性实验和增殖检测。其原理在于活细胞中的线粒体脱氢酶能将黄色的MTT还原成蓝紫色的甲瓒，沉积在细胞中。通过检测甲瓒的量，可以反映细胞的活性。活细胞越多，代谢越旺盛，还原出来的甲瓒就越多。
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MTT技术体系，即医学运动康复疗法，源于北欧，1983年由德国引入并发展至今。这个体系将医学理论与科学运动训练相结合，形成了一个以量化标准和渐进式治疗为主导的康复框架。在德国，MTT被广泛纳入医保，康复机构广泛应用。
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1、CCK8，即Cell Counting Kit-8，与MTT法的主要区别如下：原理不同 Cell Counting Kit-8：CCK-8 试剂盒利用了日本同仁化学研究所（Dojindo）开发的四唑盐WST-8 （2-（2-甲氧基-4-硝苯基）-3-（4-硝苯基）-5-（2，4-二磺基苯）-2H-四唑单钠盐）。
2、CCK8法则简化了MTT法的步骤，生成的结晶是水溶性的，使用更为便捷，但成本较高。MTT法主要用于检测细胞存活和生长，但不能直接测定绝对数量，且对实验条件要求严格。CCK8法则适合短期检测，反应时间较短，对细胞毒性低，更适合快速评估。
3、MTT法需要现配现用，且对实验条件要求较高，而CCK8则更易于保存，操作上更为直观。总体来看，CCK8法在易用性、稳定性上略胜一筹，但MTT法在某些特定实验中可能更具优势。具体选择应根据实验需求和条件来定。
4、CCK-8法能快速检测；3）CCK-8法的检测灵敏度很高，甚至可以测定较低细胞密度；4）CCK-8法的重复性优于MTT 法；5）CCK-8法对细胞毒性小；6）CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。当然，与MTT相比，CCK8有以下2点不足：1）与MTT法相 比，CCK8和XTT的价格比较贵。
