Western blot（WB）的灰度值分析是一种半定量方法，用于显示蛋白丰度的相对变化。这种分析通过比较样本中目标蛋白与其他样本（如对照组或模型组）的信号强度来确定目标蛋白表达量的增加或减少。在WB条带定量中，常用的两种方法是灰度分析和光密度分析。
·把图片转化成灰度图片，一般灰度分析的要求图片8bit就好：Image→Type→8-bit。·消除背景影响：ProcessSubtract Background. 选择50基本可以。
灰度值分析自然就成为我们的首选。延伸说一下，免疫组织化学染色（IHC）结果本身为近白色背景、棕黄色阳性表达，这时我们就不能直接用灰度反映阳性表达强弱了，而是积分吸光度，也就是咱们常说的平均光密度（IOD）。如果你真的想用灰度计算IHC结果，显然你需要将图片转为灰度图再计算。此处不表。
进行选择IOD参数。在工具栏上选择不规则AOI，点击条带中的第一个条带，随后按住Ctrl键点击下一个条带，圈住最后一个条带时点击鼠标右键完成选择。在Count/Size界面中点击CountJ键，软件就会自动对条带进行灰度计算。在Count/Size界面中点击View中的Measurement Data，查看统计结果。
可以重新测一下灰度值，调整一下。WB一般是压三张片子，可以用其他压的浅的或者压的深的替换一下当前条带，再测一下灰度。一般分析是用方差分析、T检验。统计分析是指运用统计方法及与分析对象有关的知识，从定量与定性的结合上进行的研究活动。在百度上搜索ImageJ软件然后下载到电脑上安装完毕。
多元回归研究一个因变量、与两个或两个以上自变量的回归。亦称为多元线性回归，是反映一种现象或事物的数量依多种现象或事物的数量的变动而相应地变动的规律。建立多个变量之间线性或非线性数学模型数量关系式的统。非参数检验是统计分析方法的重要组成部分，它与参数检验共同构成统计推断的基本内容。
可以重新测一下灰度值，调整一下。WB一般是压三张片子，可以用其他压的浅的或者压的深的替换一下当前条带，再测一下灰度。
首先第一步打开PS，打开图片，调整图片清晰度；然后第二步调整图片曲线；接着第三步开始调整亮度；再有第四步调整图片对比度；最后第五步调整图片的灰度。
调整PS组的灰度值可以通过调整图像的亮度、对比度、曲线等方式来实现。其中，亮度可以通过增加或减少图像的亮度值来调整灰度值，对比度可以通过增加或减少图像的对比度值来增强或减弱灰度值的区别，曲线可以通过调整图像各个灰度级别的输入输出值来精细地调整灰度值。
首先选择要调整的图像，在“图像”菜单下选择“调整”选项，然后选择“亮度/对比度”选项。在弹出的对话框中，可以通过拖动滑块来调整亮度和对比度，以达到调整灰度的效果。如果需要更加精确的调整，可以使用“曲线”工具进行调整。将曲线拉平或向下弯曲可以使颜色变得更加淡。最后，保存处理后的图像即可。
将图像变灰色的方法是将图像的RGB通道值相加，再除以3，得到的结果即为灰度值。具体地，对于每个像素，将其红、绿、蓝三个通道的值相加，再除以3，得到的结果即为该像素的灰度值。将每个像素的RGB值替换为灰度值即可得到灰度图像。
